米国CTL社のご紹介>> ELISPOTのパイオニア	キットを探す>> ELISPOTキット 製品検索

ELISPOTアッセイの概要と原理はこちらからご覧ください。

CTL社のELISPOT、FluoroSpotキットをご購入いただいたお客様で、アナライザーがご利用いただけない場合に、弊社でプレートをスキャンし結果をお返しする解析受託サービスをご提供しております。

---

各製品の詳細は下の画像のリンクをクリックしてください。

　 　　　　　　 　　　　

/検出用アナライザー	T細胞（サイトカイン）	B細胞（抗体）
発色検出モデル蛍光検出モデル
蛍光検出モデル

マルチプレックス化の最初の一歩：　発色ダブルカラーキット

CTL社はT細胞アッセイのマルチプレックス化を2色検出の酵素標識ELISPOTキットから行えるように用意しており、ポリファンクショナルな細胞を確実かつ正確に計数できます。ELISPOTは100万個のバイスタンダー細胞中の1個の放出細胞を検出できることが知られています。ヒト、非ヒト霊長類、マウス、ブタ用の全てのImmunoSpotキットは、鋭敏な感度閾値に適合するよう品質管理されています。
また、発色ダブルカラーキットにはCTL-TrueBlue™とCTL-TrueRed™の2つの基質が付属しており、色素のRGBカラースペクトルが十分に離れ、NBT発色のように青色が紫色になることがありません。このために蛍光を使用することなく、発色のダブルカラーアッセイで、マルチファンクショナル細胞をそれ以外と明確に区別できるためコストを抑えられます。

T cell ELISPOT 発色ダブルカラーキット一覧

下の表の各製品をクリックすると検索ページに移動します。
　　　 　　　　　 　　　 　　　　　 　　　　　 　　　　　 　　　　　 　　　　　

T細胞2color発色	ヒト/Human	霊長類/NHP 種別交差表	マウス/Mouse
IFN-γ/IL-2	〇	〇	〇
IFN-γ/IL-4	〇	〇	〇
IFN-γ/IL-5	〇	△	〇
IFN-γ/IL-6	〇	△	〇
IFN-γ/IL-10	〇	〇	〇
IFN-γ/IL-12	〇	△	-
IFN-γ/IL-13	〇	〇	-
IFN-γ/IL-17	〇	〇	〇
IFN-γ/IL-21	〇	×	-
IFN-γ/IL-22	〇	×	-
IFN-γ/TNF-α	〇	〇	〇
IFN-γ/GzB	〇	×	-
IL-10/IL-12	〇	△	-
IL-10/IL-17	〇	〇	-
IFN-γ/Perforin	〇	〇	-
GzB/Perforin	〇	×	-
GzB/IL-2	〇	×	-
GzB/TNF-α	〇	×	-
TNF-α/IL-2	〇	〇	〇
TNF-α/Perforin	〇	〇	-
IFN-γ/GM-CSF	〇	〇	-

霊長類/NHPはヒト用キットとの交差性を確認したものです。【カニクイザル/Cynomolgus macaques、アカゲザル/Rhesus macaques、サバンナモンキー/African green monkey、ブタオザル/Pig-tailed Macaque】

キット構成

◆ PVDFメンブレンプレート
◆ CTL TEST Medium
◆ キャプチャー抗体
◆ 検出用抗体（ビオチンラベル、FITCラベル）
◆ 抗体希釈液
◆ 標識済みターシャリー （ストレプトアビジン-AP、抗FITC 抗体-HRP）
◆ 発色基質（CTL-Blue、CTL-Red）
◆ 基質希釈液
◆ Anti-CD28抗体（0.1mg/mL)※一部のキットのみ

B cell ELISPOT 発色ダブルカラーキット一覧

下の表の各製品をクリックすると検索ページに移動します。
　　　　　　 　　　

B細胞2color発色	ヒト/Human	カニクイザル /Cynomolgus	マウス/Mouse
IgA/IgG	〇	〇	〇
IgG/IgM	〇	〇	〇
IgE/IgG	〇	-	-
IgA/IgE	〇	-	-
IgA/IgM	〇	〇	〇
IgE/IgG4	〇	-	-
IgG1/IgG2a	-	-	〇(Balb/c)*
IgG1/IgG2b	-	-	〇
New IgG1/IgG2c	-	-	○(C57BL/6)*
IgG1/IgG3	-	-	〇
IgG2a/IgG2b	-	-	〇(Balb/c)*
IgG2a/IgG3	-	-	〇(Balb/c)*
IgG2b/IgG3	-	-	〇
IgG2a/IgM	-	-	〇(Balb/c)*
IgG2b/IgM	-	-	〇
New IgG2c/IgM	-	-	○(C57BL/6)*
IgG1/IgM	-	-	〇
IgG3/IgM	-	-	〇

*Balb/c (IgHa)のみ、C57BL/6(IgHb)のみ その他IgM、IgA、IgG、IgE、IgG1、IgG3、IgG2bはマウス系統C57BL/6、BALB/c両方で交差反応性あり

キット構成

◆ PVDFメンブレンプレート
◆ Igキャプチャー抗体
◆ 検出用抗体（ビオチンラベル、FITCラベル）
◆ 抗体希釈液
◆ 標識済みターシャリー （ストレプトアビジン-AP、抗FITC 抗体-HRP）
◆ 発色基質（CTL-Blue、CTL-Red）
◆ 基質希釈液
◆ B-Poly-S (B細胞アクチベーター）^※
※Ferretキットを除く

蛍光マルチカラーFluorospot

上の図：4-color T cell Fluorospot（IFN-γ, IL-2, TNF-α, Granzyme B）の同時検出

FluoroSpotアッセイの利点

包括的な免疫モニタリング

FluoroSpotアッセイの最も大きな利点は、複数の異なるサイトカイン（またはB細胞の分泌された免疫グロブリンクラスとサブクラス）を同じアッセイで同時に検出できることです。 ELISPOTで使用される酵素/発色基質システムでは、メソッドの制限により、アナライトの数が最大2つに制限されます。2、3、4色のFluoroSpotは研究者にとって多くの利点がある従来のELISPOTアッセイ手法の精度と感度を維持します。

FluoroSpotアッセイは、活性化T細胞によって分泌されるさまざまなサイトカインおよびエフェクター分子を測定し、T細胞免疫のエフェクター系統に関する貴重な情報を提供します。例えば、最近関心が高まっている分野は、多機能性T細胞の研究です。これは、複数の異なるサイトカインを分泌することが示されている細胞です。

CD8⁺細胞研究に対するマルチカラーFluoroSpotの有用性

2つ以上のサイトカインを分泌する多機能性CD8⁺T細胞は、より高いレベルの防御免疫を付与することが示唆されており、一方で単一のサイトカインを分泌するCD8⁺T細胞は、ウイルスの除去やウイルスの再攻撃に対する防御を提供するのに必ずしも効果的ではありません。多機能性T細胞が分泌する多量のIFN-g / IL-2はウイルス感染への防御と相関しますが、どちらかのサイトカインのみを分泌する細胞は感染への防御と相関しませんでした。
したがって、ウイルス感染の進行を制御する能力は、免疫応答の品質、すなわちウイルスに対するCD8⁺T細胞応答の機能性と強く相関しています。

クリックでさらに表示

IFN-γ、IL-2、TNF-α、MIP-1βといったサイトカインのプロデューサーが共発現しているT細胞の比率が高いことは、ウイルスの除去や疾患の非進行と強く相関します。これらの相互に関連する複雑な共発現パターンは、現在進行中の集中的な研究の主題であり、FluoroSpotアッセイはそのような多機能性T細胞の研究に最適です。 FluoroSpotアッセイは、単一のアッセイウェルで多機能T細胞と単一サイトカイン産生細胞の相対数を検出およびカウントできます。個々に重複しない波長の蛍光ラベルを使用することで、個々のサイトカインと共分泌サイトカインを簡単に区別できます。

CD4⁺細胞研究に対するマルチカラーFluoroSpotの有用性

FluoroSpotアッセイは、PBMCまたは分離または濃縮されたCD4⁺T細胞集団内の異なるタイプのヘルパーT細胞を検出しカウントするための効果的な方法です。デュアルカラーFluoroSpotアッセイは、1回のアッセイでTh1型細胞とTh2型細胞を区別するための簡単で迅速な手段を研究者に提供することもできます。例えば、IFN- / IL-4 FluoroSpotはTh1細胞とTh2細胞を区別できます。同様に、Th1対Th17、またはTh1対Treg細胞集団を視覚化して、各タイプの頻度を決定することができます。

B cell FluoroSpotの有用性

FluoroSpotアッセイの別の有用な用途は、同じアッセイウェル内で異なる免疫グロブリン（Ig）クラスとIgGサブクラスを分泌する抗体分泌細胞のポピュレーションを決定することです。 ここでは、さまざまなIgクラスやサブクラスの頻度を解析することができます。

T cell Fluorospotダブルカラーキット一覧

下の表の各製品をクリックするとCTL社製品ページに移動します。
　　　 　　　　　　 　　　 　　　　　　 　　　　　　 　　　　　　 　　　　　　 　　　　　 　　　　　 　　　　　 　　　　　 　　　　　 　　　　　

T細胞2color蛍光	ヒト/Human	カニクイザル /Cynomolgus	アカゲザル /Rhesus	マウス/Mouse
IFN-γ/IL-2	〇	〇	〇	〇
IFN-γ/IL-4	〇	〇	〇	〇
IFN-γ/IL-5	〇	〇	〇	〇
IFN-γ/IL-6	〇	△	△	〇
IFN-γ/IL-10	〇	〇	〇	〇
IFN-γ/IL-12	〇	△	△	-
IFN-γ/IL-13	〇	〇	〇	-
IFN-γ/IL-17	〇	〇	〇	〇
IFN-γ/IL-21	〇	×	×	-
IFN-γ/IL-22	〇	×	×	-
IFN-γ/TNF-α	〇	〇	〇	〇
IFN-γ/GzB	〇	×	×	-
IL-5/IL-4	〇	△	△	-
IL-5/IL-17	〇	△	△	-
IL-10/IL-12	〇	〇	〇	-
IL-10/IL-17	〇	△	△	-
IFN-γ/Perforin	〇	〇	〇	-
GzB/Perforin	〇	×	×	-
GzB/IL-2	〇	×	×	-
GzB/TNF-α	〇	×	×	-
TNF-α/IL-2	〇	〇	〇	〇
TNF-α/Perforin	〇	〇	〇	-
IFN-γ/GM-CSF	〇	〇	〇	-

カニクイザル、アカゲザルはヒト用キットとの交差性を確認したものです。〇:Good、△:Medium、×:Poor

grade2 CMV抗原とCD28抗体で刺激後24時間培養したヒトPBMC(250,000 cells/well)のFluorospotデータ

T cell Fluorospot 3-color キット一覧

---

下の表の各製品をクリックすると検索ページに移動します。
　　　 　　　　　　 　　　　　 　　　　　 　　　　　 　　　　　 　　　　　 　　　　　　 　　　　　 　　　　　　 　　　　　 　　　　　 　　　　　 　　　　　 　　　　　 　　　　　　 　　　　　　

T細胞3color蛍光	ヒト/Human	霊長類/NHP 種別交差表	マウス/Mouse
IFN-γ/IL-2/GzB	〇	×	-
IFN-γ/IL-2/IL-17	〇	〇	-
IFN-γ/IL-2/IL-21	〇	×	-
IFN-γ/IL-2/IL-5	〇	△	-
IFN-γ/IL-2/Perforin	〇	〇	-
IFN-γ/TNF-α/IL-2	〇	〇	〇
IFN-γ/TNF-α/IL-4	〇	〇	New 〇
IFN-γ/TNF-α/IL-5	〇	△	-
IFN-γ/TNF-α/IL-6	〇	△	〇
IFN-γ/TNF-α/IL-10	〇	〇	〇
IFN-γ/TNF-α/IL-17	〇	〇	〇
IFN-γ/TNF-α/GzB	〇	×	-
IFN-γ/TNF-α/Perforin	〇	〇	-
IFN-γ/IL-4/IL-10	〇	〇	-
IFN-γ/IL-4/IL-17	-	-	〇
IFN-γ/IL-4/IL-5	-	-	〇
IFN-γ/IL-5/IL-10	〇	△	-
IFN-γ/IL-5/IL-17	〇	△	-
IFN-γ/IL-6/IL-10	〇	〇	-
New IFN-γ/IL-10/IL-2	〇	〇	-
IFN-γ/IL-10/IL-12	〇	〇	-
IFN-γ/IL-10/IL-17	〇	〇	-
IFN-γ/GzB/Perforin	〇	×	-
IFN-γ/GzB/IL-5	〇	×	-
IFN-γ/GzB/IL-10	〇	×	-
IFN-γ/GzB/IL-17	〇	×	-
IL-10/TNF-α/IL-5	〇	△	-
IL-10/TNF-α/IL-17	〇	〇	-

NHPはヒト用キットとの交差性を確認したものです。〇:Good、△:Medium、×:Poor

CEF peptide poolで刺激後24時間培養したヒトPBMC(200,000 cells/well)のFluorospotデータ

T cell Fluorospot 4-color キット一覧

下の表の各製品をクリックするとCTL社製品ページに移動します。

　　　 　　　 　　　　　　 　　　　　 　　　　　 　　　　　 　　　　　 　　　　 　　　　　

T細胞4color蛍光	ヒト/Human	霊長類/NHP 種別交差表
IFN-γ/IL-2/IL-5/GzB	〇	×
IFN-γ/IL-2/TNF-α/GzB	〇	×
IFN-γ/IL-2/IL-5/IL-17	〇	△
IFN-γ/TNF-α/IL-5/IL-4	〇	△
IFN-γ/IL-2/TNF-α/Perforin	〇	〇
IFN-γ/IL-2/IL-10/TNF-α	〇	〇
IFN-γ/IL-2/GzB/Perforin	〇	×
New IFN-γ/IL-2/GzB/IL-10	〇	×

NHPはヒト用キットとの交差性を確認したものです。〇:Good、△:Medium、×:Poor

PHAで刺激後一晩培養したヒトPBMC(250,000 cells/well)のFluorospotデータ

マルチカラー T細胞Fluorospotキットの構成

Capture kitとDetectio Kitのセットでご購入下さい。

---

Capture Kit
◆キャプチャー抗体各種
◆抗体希釈液
◆CTL-TEST Medium
◆ 96-wel 低自家蛍光PVDFフィルタープレート
◆ Anti-CD28抗体（0.1mg/mL)※一部のキットのみ
※プレートシールは付属しておりません。

FAQs: Fluorospotでアッセイを分割する

---

Detection Kit（検出するサイトカイン毎に必要です）
2color Kitは①と③、3color Kitは①②③、4color kitは①②③④の組み合わせです。
①
◆FITCラベル抗体
◆Anti-FITC AlexaFluor®488
②
◆Hapten2ラベル抗体
◆Anti-Hapten2 CTL-Yellow™
③
◆Hapten3ラベル抗体
◆Anti-Hapten3 CTL-Red™
④
◆ビオチンラベル抗体
◆ストレプトアビジン eFluor®450

B cell Fluorospotダブルカラーキット一覧

カタログ番号、製品名からお探しの場合はELISPOTキット 製品検索ページをご覧ください。

---

　　　　　　 　　　

B細胞2color蛍光	ヒト/Human	カニクイザル /Cynomolgus	マウス/Mouse	New フェレット/Ferret
IgG/IgM	〇	〇	〇	-
IgA/IgE	〇	-	-	-
IgA/IgG	〇	〇	〇	-
IgA/IgG1	〇	-	-	-
IgA/IgG2	〇	-	-	-
IgA/IgG3	〇	-	-	-
IgA/IgG4	〇	-	-	-
IgA/IgM	〇	〇	〇	-
IgG1/IgM	〇	-	〇	-
IgG2/IgM	〇	-	-	-
IgG3/IgM	〇	-	〇	-
IgG4/IgM	〇	-	-	-
IgG1/IgG3	〇	-	〇	-
IgG1/IgG4	〇	-	-	-
IgG2/IgG3	〇	-	-	-
IgG3/IgG4	〇	-	-	-
IgE/IgG4	〇	-	-	-
IgG1/IgG2a	-	-	〇	-
IgG1/IgG2b	-	-	〇	-
New IgG1/IgG2c	-	-	〇	-
IgG2a/IgG2b	-	-	〇(Balb/c)*	-
IgG2a/IgG3	-	-	-	〇(Balb/c)*
IgG2b/IgG3	-	-	〇	-
IgG2b/IgM	-	-	〇	-
Igκ/IgG	-	-	-	New 〇
Igκ/Igλ	-	-	-	New 〇
Igλ/IgG	-	-	-	New 〇

カニクイザル、アカゲザルはヒト用キットとの交差性を確認したものです。〇:Good、△:Medium、×:Poor

B cell Fluorospot 3-colorキット一覧

カタログ番号、製品名からお探しの場合はELISPOTキット 製品検索ページをご覧ください。

---

　　　

B細胞3color蛍光	ヒト/Human	カニクイザル /Cynomolgus	マウス/Mouse	New フェレット/Ferret
IgE/IgG3/Ig4	〇	-	-	-
IgA/IgG/IgM	〇	〇	○	-
IgA/IgG1/IgG3	〇	-	-	-
New IgA1/IgA2/IgG	〇	-	-	-
IgG1/IgG2/IgG3	〇	-	-	-
IgG1/IgG3/IgG4	〇	-	-	-
IgG1/IgG2a/IgG2b	-	-	〇	-
IgG1/IgG2a/IgM	-	-	〇	-
IgG1/IgG2a/IgG3	-	-	〇	-
IgG1/IgG2b/IgG3	-	-	〇	-
IgG1/IgG2b/IgM	-	-	〇
IgG2a/IgG2b/IgG3	-	-	〇	-
New IgG1/IgG2b/IgG2c	-	-	〇	-
New Igκ/Igλ/IgG	-	-	-	〇

B cell Fluorospot 4-colorキット一覧

カタログ番号、製品名からお探しの場合はELISPOTキット 製品検索ページをご覧ください。

---

　　　

B細胞 4color 蛍光	ヒト/Human	マウス/mouse
IgE/IgG1/IgG3/IgG4	〇
IgA/IgE/IgG/IgM	〇	〇
IgA/IgG1/IgG3/IgM	〇
IgA/IgG1/IgG2a/IgM	-	〇
IgA/IgG1/IgG2a/IgG2b	-	〇
New IgA1/IgA2/IgG/IgM	〇	-
IgG1/IgG3/IgG4/IgM	〇
IgG1/IgG2/IgG3/IgG4	〇
IgG1/IgG2a/IgG2b/IgM		〇
IgG1/IgG2a/IgG3/IgM		〇
IgG1/IgG2b/IgG3/IgM		〇
IgG2a/IgG2b/IgG3/IgM		〇

マルチカラー B細胞Fluorospotキットの構成

Capture kitとDetectio Kitのセットでご購入下さい。

---

Capture Kit
◆Igキャプチャー抗体
◆抗体希釈液
◆B-Poly-S (B細胞アクチベーター）^※
◆ 96-wel 低自家蛍光PVDFフィルタープレート
※Ferretキットを除く

FAQs: Fluorospotでアッセイを分割する

---

Detection Kit（検出するIg毎に必要です）
2color Kitは①と③、3color Kitは①②③、4color kitは①②③④の組み合わせです。
①
◆FITCラベル抗体
◆Anti-FITC AlexaFluor®488
②
◆Hapten2ラベル抗体
◆Anti-Hapten2 CTL-Yellow™
③
◆Hapten3ラベル抗体
◆Anti-Hapten3 CTL-Red™
④
◆ビオチンラベル抗体
◆ストレプトアビジン eFluor®450

法規制等

ELISPOT、FluoroSpotキットの検索サイトにて各製品の法規制情報をご確認下さい。


CTL社 ImmunoSpot Kitはすべてカルタヘナ非該当です。

関連製品

ELISPOT解析受託サービス	T細胞ELISPOTキット	B細胞ELISPOTキット	ELISPOTアナライザー
ヒト末梢血単核球（PBMC)	抗原とポジティブコントロール	C.T.L社無血清培地と各種試薬

アプリケーションノート