Prime Taq DNAポリメラーゼを段階希釈し、50 pgのLambda DNAを増幅した。
M : 100 bp DNA Marker(M-1000, Genetbio)
Lane 1 : 1U Prime Taq DNA Polymerase
Lane 2 : 0.5U Prime Taq DNA Polymerase
Lane 3 : 0.25U Prime Taq DNA Polymerase
Lane 4 : 0.125U Prime Taq DNA Polymerase
cDNAの増幅比較テスト
キット内容
◆ Prime Taq DNA Polymerase (5 units/ul): 50 ul
- Storage buffer:
20 mM Tris-HCl (pH 8.0), 100 mM KCl, 0.5 mM EDTA, 0.1 mM DTT,0.5% Tween20, 0.5% Nonidet P-40 and 50% Glycerol
◆ 10X reaction buffer: 1ml
500 mM Tris-HCl (pH 9.0), 20 mM MgCl2, 200 mM (NH4)2SO4 and PCR enhancers
◆ 10 mM dNTPs Mixture: 0.5 ml
2.5 mM each of dATP, dCTP, dGTP and dTTP
試薬量の目安
20 μl 反応系: 500回
50 μl 反応系: 200回
反応系の一例(20 μl, 50 μl)
Components
添加量
10X Reaction buffer
2 μl
5 µl
10 mM dNTP Mix.
(2.5 mM of each)
1 ~ 5 µl
1 ~ 5 µl
Upstream Primer (10 pmoles/μl)
0.2 ~ 2.0 µl
0.2 ~ 2.0 µl
Downstream Primer(10 pmoles/μl)
0.2 ~ 2.0 µl
0.2 ~ 2.0 µl
Prime Taq DNA Pol. (5 Unit/μl)
0.5 ~ 1 U
1.25 ~ 2.5 U
Template DNA※
10 fg~1 µg
10 fg~1 µg
Sterilized D.W
可変(総量を調整する)
Total Volume
20 µl
50 µl
※ テンプレートの量:
- Bacteriophage lambda, cosmid, plasmid: 10 fg ~ 300 ng
- Total genomic DNA: 100 ng ~ 1 µg
Prime Taq Premix
Prime Taq Premix特徴
Prime Taq Premix は、Prime Taq DNA Polymerase、10X reaction buffer、dNTP 混合液、酵素安定化剤、電気泳動用沈降剤とローディング色素で構成されており、ユーザーの利便性を最大限に高めることが可能です。
20 μl反応系において100回分の容量です。
製品内容
◇ 2X Prime Taq Premix (1.0 ml X 1, 100反応分)
- with Prime Taq DNA Polymerase, reaction buffer, enzyme stabilizer, dNTPs mixture and loading dye
反応系の一例(20 μl)
Components
Volume
Final Conc.
2X Prime Taq Premix
10 µl
1X
Upstream Primer
任意
0.1 ~ 1.0 µM
Downstream Primer
任意
0.1 ~ 1.0 µM
Template DNA※
任意
10 fg~1 µg
Sterilized D.W
任意(20 µlまで)
Total Volume
20 µl
※ テンプレートの量:
- Bacteriophage lambda, cosmid, plasmid: 10 fg ~ 300 ng
- Total genomic DNA: 100 ng ~ 1 µg